在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因A,如果想由此获得该基因的单克隆抗体,请简要叙述实验原理及实验方案。在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因A,如果想由此获得该基因的单克隆抗体,请简要叙述实验原理及实验方案。

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在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因A,如果想由此获得该基因的单克隆抗体,请简要叙述实验原理及实验方案。

(1)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因A,如果想由此获得该基因的单克隆抗体,请简要叙述实验原理及实验方案。

【◆参考答案◆】:(1)实验原理骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体;而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将分离获得的基因A表达的蛋白免疫小鼠脾细胞,免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞继承了两个亲代细胞的特性,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又具有免疫的B淋巴细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基(含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤A.和胸腺嘧啶核苷(T))中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡。未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养即可无限制地制备单克隆抗体。(2)实验方案①抗原提纯与动物免疫;②骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备;③细胞融合;④筛选融合细胞;⑤单克隆抗体的制备和冻存;⑥单克隆抗体的纯化。

(2)【◆题库问题◆】:[填空题] 在内质网上合成的蛋白主要包括()、()、某些细胞器的驻留蛋白和需修饰的蛋白等。

【◆参考答案◆】:胞外分泌的蛋白;膜整合蛋白

(3)【◆题库问题◆】:[判断题] 人的每条染色体上都有一个核仁组织区,参与形成核仁。
A.正确
B.错误

【◆参考答案◆】:正确

(4)【◆题库问题◆】:[单选] 游离于细胞质中的核糖体,主要合成()
A.外输性蛋白质
B.溶酶体内蛋白
C.细胞本身所需的结构蛋白
D.膜骨架蛋白
E.细胞外基质的蛋白质

【◆参考答案◆】:C

(5)【◆题库问题◆】:[填空题] 膜脂的不对称性指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈(),膜蛋白的不对称性指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的()。

【◆参考答案◆】:不均匀分布;方向性

(6)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 细胞周期具有哪几个主要的检验点(checkpoint)?

【◆参考答案◆】:G1期检验点:DNA是否损伤,细胞外环境是否适宜,细胞体积是否足够大。S期检验点:DNA是否复制完成。G2期检验点:DNA是否损伤,细胞体积是否足够大。M期检验点:纺锤体是否连到染色体上。

(7)【◆题库问题◆】:[单选] 一般血型物质都是细胞膜上的()
A.糖原
B.脂蛋白
C.蛋白质
D.糖脂或糖蛋白
E.磷脂

【◆参考答案◆】:D

(8)【◆题库问题◆】:[填空题] 胞内体的作用是运输由()作用新摄入的物质到溶酶体被降解。

【◆参考答案◆】:胞吞

(9)【◆题库问题◆】:[多选] 既有自我复制的能力、又有免疫能力的细胞是()
A.T淋巴细胞
B.B淋巴细胞
C.骨髓细胞
D.干细胞

【◆参考答案◆】:A, B

(10)【◆题库问题◆】:[单选] 减数分裂过程中,联会一般发生在()
A.细线期
B.偶线期
C.双线期
D.终变期

【◆参考答案◆】:B

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